바이러스학 실험 결과보고서 Cell harvest & Protein sampling

1. Title : Cell harvest & Protein sampling

2. Objective : 크기에 따라 단백질을 분리하는 SDS-PAGE를 하기위해서 poliovirus에 감염된 BGM cell을 용해시킨 후, 단백질을 추출하고 정량한다.

3. Method

1) Cell harvest
① 배지를 e-tube에 수거한다.
② PBS로 washing 하고 1ml PBS를 추가한다.
③ Scraper로 긁어 모아 e-tube에 담는다.
④ 5,000rpm/5min centrifugation
⑤ 상등액을 suction해서 pellet을 취한다.

2) Protein sampling
① Pellet에 lysis buffer를 넣는다.
② Voltexing하여 pellet을 살짝 풀어준 후 deep freezer (-80℃)에 15분간 넣어둔다.
③ 37℃ water bath에 살짝 녹인 후 centrifugation (13,000rpm, 15min, 4℃)
④ 상등액을 새로운 e-tube에 옮긴다.
⑤ O.D값을 측정한다.

(중략)

5. Discussion

이번 실험으로는 BGM cell을 sub cultre하고 seeding 한 후 virus를 감염시킨 BGM cell을 수거하여서 Cell harvest 후 Protein sampling을 통해 단백질을 추출하고 정량했다.

먼저 Cell harvest로 배지를 e-tube에 수거한다. PBS 1.5ml씩 넣어 washing 하고 1ml PBS를 추가한다. 배지의 단백질을 제거하…(생략)