1. Title : RT-PCR
2. Objective : poliovirusÀÇ RNA¸¦ RT-PCRÀ» ÀÌ¿ëÇØ cDNA·Î ¸¸µç µÚ, PCRÀ» ÀÌ¿ëÇØ ÁõÆø½ÃŲ ÈÄ Àü±â ¿µµ¿ÇÏ¿© Å©±â¸¦ °üÂûÇÑ´Ù.
3. Principle : poliovirusÀÇ RNA¿¡ ƯÀÌÀûÀ¸·Î °áÇÕÇÏ´Â ÇÁ¶óÀ̸Ӹ¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© poliovirusÀÇ cDNA¸¸À» ¸¸µé ¼ö ÀÖÀ¸¸ç Àü±â¿µµ¿À¸·Î ¹êµå¸¦ °üÂûÇÑ´Ù.
4. Method
1) RT-PCR : cDNA»ý¼º
RT-PCRÀº È¥ÇÕ½ÃŲ premix¸¦ »ç¿ë. premix¿¡´Â taq pol, dNTP, PCR ÃÖÀûÀÇ buffer°¡ µé¾î°¡ ÀÖ´Ù. premix¿Í RNA ÁÖÇüÀ» 5ul, primer 3ul, RNA free water 13ul¸¦ ³Ö¾îÁØ´Ù.
¨ç 72¡É¿¡¼ 5ºÐ
¨è 42¡É¿¡¼ 60ºÐ
¨é 94¡É¿¡¼ 5ºÐ°£
(Áß·«)
6. Discussion
ÁßÇÕÈ¿¼Ò¿Í ¿¬¼â¹ÝÀÀ¹ý°ú ¿ªÀü»çÈ¿¼Ò ¹ÝÀÀÀ» È¥ÇÕÇÑ RT-PCR(reverse tran½ºÅ©¸³Æ®ase -polymerase chain reaction)¹ýÀº ¼¼Æ÷¿¡¼ ÃßÃâÇÑ mRNA¿¡¼ cDNA¸¦ ÇÕ¼ºÇÏ°í ÀÌ°ÍÀ» ÁÖÇüÀ¸·Î ÇÏ¿© PCR·Î ÁõÆøÇÑ ÈÄ ºÐ¼®ÇÏ´Â ±â¼úÀÌ´Ù. ÀÌ ¹æ¹ýÀ¸·Î mRNA Á¾·ù¸¦ È®ÀÎÇÏ°í À¯ÀüÀÚ ¹ßÇö ¼öÁØÀ» ¾Ë¾Æ³¾ ¼ö ÀÖ´Ù.
(Áß·«)
|