[서강대학교 현대생물학실험2] (4차 풀레포트) Site-directed mutagenesis, DNA sequencing

1. Abstract

이 연구는 사이트 지향 돌연변이 생성(site-directed mutagenesis) 기술과 DNA 서열 분석을 활용하여 특정 유전자 변이를 유도하고 그 결과를 분석하는 데 초점을 맞추었다. 사이트 지향 돌연변이는 특정 위치의 DNA 서열을 교체하거나 변형하여 원하는 특성을 가진 단백질을 생산하기 위해 널리 사용되는 기술이다. 본 연구에서는 지속적인 단백질 연구와 기능 분석을 위한 기반 기술로서 이 방법론을 이용하였다. 특정 유전자에서 목표로 하는 아미노산 잔유서를 변형하기 위해 프라이머 설계를 신중하게 진행하였고, 그 후 PCR(중합효소 연쇄 반응)을 통해 변이가 포함된 DNA 조각을 증폭하였다. 이를 통해 생성된 변형된 DNA는 적절한 플라스미드 벡터에 클로닝하여 대장균에서 발현을 유도하였다. 변형된 단백질의 발현 및 정제를 확인하기 위해 SDS-PAGE 분석을 실시하였고, 이어서 DNA 서열 분석을 통해 의도적인 돌연변이가 성공적으로 도입되었음을 확인하였다. 이러한 과정에서 얻어진 데이터는 변이 유전자가 발현하는 단백질의 기능에 대한 깊은 이해를 제공하며, 단백질 공학 및 생명정보학 분야에서 응용 가능성을 제시한다. 연구의 결과는 단백…(생략)