Plasmid 분리(Principle of plasmid isolation, Principle of DNA and RNA quantification, pEGFP-N1 vector의 구조와 특징)

1. Plasmid DNA

Plasmid DNA는 박테리아와 일부 유전자 조작 생물체에서 발견되는 작은 원형의 이중 나선 구조를 가진 DNA이다. Plasmid는 대개 1kb에서 수십 kb의 크기로 존재하며, 세포 내에서 독립적인 복제를 할 수 있는 능력을 지닌다. Plasmid는 주요 염색체 DNA와는 달리 세포 분열 간에 각기 독립적으로 복제되며, 이를 통해 유전 정보를 세대 간에 전파할 수 있다. Plasmid의 가장 중요한 특징 중 하나는 그들이 주로 항생제 저항성 유전자를 포함하고 있다는 점으로, 이러한 특성 덕분에 플라스미드는 미생물의 진화 과정에서 중요한 역할을 한다. Plasmid DNA의 분리는 세균에서 얻어진 플라스미드를 분리하여 이들을 정제하는 과정이다. 이 과정은 박테리아 배양, 세포 파쇄, 그리고 DNA를 분리하는 여러 단계로 구성되어 있다. 일반적으로 사용되는 박테리아는 대장균이며, 플라스미드를 함유한 박테리아를 배양한 후, 세포를 파쇄하여 내부의 플라스미드를 방출한다. 이후 원심분리 등의 방법을 통해 세포 잔여물과 같은 불순물을 제거하고, 순수한 플라스미드 DNA를 얻는다. 이 과정에서 리신 효소, 세제, 및 각각의 화학 시약들이 사용되어 세포막을 파괴하…(생략)