1. Buffers
Western blotting¿¡¼ ¹öÆÛ´Â ½ÇÇèÀÇ ¼º°ø¿¡ Áß¿äÇÑ ¿ªÇÒÀ» ÇÑ´Ù. ÀϹÝÀûÀ¸·Î »ç¿ëµÇ´Â ¹öÆÛ´Â »ùÇÃÀ» ÁغñÇÏ°í ´Ü¹éÁúÀ» Àü±â¿µµ¿ÇÏ´Â °úÁ¤¿¡¼ °¢°¢ÀÇ ´Ü°è¿¡¼ ÀûÀýÇÑ È¯°æÀ» Á¦°øÇÑ´Ù. ÀÌ °úÁ¤¿¡¼ »ç¿ëµÇ´Â ´ëÇ¥ÀûÀÎ ¹öÆÛ¿¡´Â ¶óµð¿À·º½º ¹öÆÛ, Æ®¸®½º-±Û¸®½Å ¹öÆÛ, ±×¸®°í SDS-PAGE ¹öÆÛ µîÀÌ ÀÖ´Ù. ÀÌµé °¢°¢ÀÇ ¹öÆ۴ ƯÁ¤ÇÑ pH¿Í ÀÌ¿Â °µµ¸¦ À¯ÁöÇϱâ À§ÇØ ¼³°èµÇ¾úÀ¸¸ç, ´Ü¹éÁúÀÇ ¾ÈÁ¤¼º°ú È°¼º¼º¿¡ Å« ¿µÇâÀ» ¹ÌÄ£´Ù. ¸ÕÀú, »ùÇà Áغñ ´Ü°è¿¡¼ »ç¿ëÇÏ´Â ¶óµð¿À·º½º ¹öÆÛ´Â ´Ü¹éÁúÀ» ºÐÇØÇÏ°í, º¯¼ºÀ» ÃËÁøÇÏ´Â ¿ªÇÒÀ» ÇÑ´Ù. ÀÌ ¹öÆÛ´Â ÁÖ·Î Æ®¸®½º(Tris)¿Í ±Û¸®½Å(Glycine) È¥ÇÕ¹°·Î ±¸¼ºµÇ¾î ÀÖÀ¸¸ç, pH´Â ÀϹÝÀûÀ¸·Î Áß¼º¿¡ °¡±õ°Ô À¯ÁöµÈ´Ù. ÀÌ È¯°æÀº ´Ü¹éÁúÀÌ ÀÚ¿¬ »óÅ¿¡¼ ½±°Ô º¯ÇüµÉ ¼ö ÀÖµµ·Ï µµ¿ÍÁÖ¸ç, Æú¸®ÆéŸÀ̵尡 Àü±â¿µµ¿ °úÁ¤¿¡¼ Àß ºÐ¸®µÉ ¼ö ÀÖµµ·Ï ÇÑ´Ù. Àü±â¿µµ¿ °úÁ¤¿¡¼ ÁÖ·Î »ç¿ëµÇ´Â Æ®¸®½º-±Û¸®½Å ¹öÆÛ´Â ´Ü¹éÁú °£ÀÇ Àü±âÀû À̵¿À» º¸ÀåÇÏ´Â ¿ªÇÒÀ» ÇÑ´Ù. ÀÌ ¹öÆÛ´Â Àü±âÀå¿¡ ´ëÇÑ ÀúÇ×À» ÃÖ¼ÒÈÇϴ Ư¼ºÀÌ ÀÖÀ¸¸ç, µû¶ó¼ ´Ü¹éÁúÀÌ ¿Ã¹Ù¸£°Ô À̵¿ÇÒ ¼ö ÀÖµµ·Ï µ½´Â´Ù. ¶ÇÇÑ, pH°¡ ÀÏÁ¤ÇÏ°Ô À¯ÁöµÇ¸ç, ÀÌ´Â ´Ü¹éÁúÀÇ¡¦(»ý·«)
|