SDS page gel electrophoresis 및 western blotting 실험 목적 및 원리 보고서

1. 단백질 전기영동

단백질 전기영동은 생물학적 샘플에서 단백질을 분리하고 정량화하는 중요한 기술로, 주로 SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)가 사용된다. 이 기술은 단백질의 크기와 전하에 따라 분리할 수 있도록 해준다. SDS는 음전하를 띠는 계면활성제로 단백질에 결합하여 부정전하 전하를 부여하고, 이로 인해 단백질의 원래 구조와 전하에 상관없이 분자량에 따라 분리될 수 있도록 한다. 전기영동 과정에서는 여러 단계가 있으며, 먼저 아크릴아미드 겔이 준비된다. 아크릴아미드는 중합 반응을 통해 겔 상태로 형성되며, 겔의 농도는 분리하고자 하는 단백질의 분자량에 따라 조절된다. 그 다음 샘플을 로딩하기 위해 겔에 우물을 형성하고 모든 샘플에 SDS를 주입하여 단백질을 변성시킨 후, 겔에 로딩한다. 전기 영동이 시작되면 전압이 가해져서 전류가 흐르고, 전하를 띤 단백질은 음극에서 양극으로 이동하게 된다. 이때 단백질은 SDS에 의해 주어진 전하로 인해 크기별로 이동 속도가 다르며, 작은 단백질일수록 빠르게 이동하고 큰 단백질일수록 느리게 이동하게 된다. 겔 내에서 단백질의 크기에 따라 나누어진 …(생략)