RNA prep and cDNA synthesis 레포트

1. 서론

세포 용해 버퍼)을 포함할 수 있다. 그 후, RNA는 페놀-클로로포름 추출법이나 실리카 기반의 컬럼을 사용하여 다양한 불순물, 단백질, DNA 등으로부터 분리된다. RNA의 순도와 농도는 나중의 실험에서 중요한 변수가 되므로, 정량적인 평가가 필요하다. 일반적으로 UV 스펙트로미터를 사용하여 RNA의 농도를 측정하며, 260nm에서의 흡광도를 통해 RNA의 양을 파악하고, 260/280 비율을 통해 단백질 오염 여부를 평가한다. cDNA 합성 과정은 RNA가 단백질 합성을 위한 전사(transcription) 과정을 거쳐야 하는데, 이러한 전사체를 보고자 할 때 cDNA(complementary DNA)의 합성이 필요하다. 이 과정은 RNA의 역전사를 통해 이루어지며, 주로 역전사효소(Reverse Transcriptase)를 사용한다. cDNA 합성에서, RNA 템플릿에 대해 primer를 결합한 후 역전사효소가 RNA의 주형을 따라 cDNA를 합성한다. 이 과정에서 RNA의 이중 나선 구조가 풀리고, 단일 가닥 RNA에 상응하는 이중 가닥의 cDNA가 생성된다. cDNA 합성 후, PCR(중합효소 연쇄 반응)이나 qPCR(정량적 중합효소 연쇄 반응)과 같은 기술을 통해 특정 유전자 발현 수준을 정량화하고 분석할 수 있다. 이러한…(생략)