서강대학교 현대생물학실험2 2차 풀레포트 TA Cloning과 Mini-Prep, Restriction enzyme , Gel electrophoresis

1. Abstract

Abstract 본 실험에서는 TA Cloning, 미니 프렙(Mini-Prep), 제한 효소 분석 및 겔 전기영동을 통해 DNA 조작의 기초 원리를 이해하고 실습하기 위한 과정을 거쳤다. TA Cloning은 특정 DNA 염기서열을 클로닝하기 위한 유용한 방법으로, Taq DNA 폴리메라아제가 합성한 PCR 생성물의 3` 말단에 아데닌(A)이 부착되어 있어 이 DNA 조각을 플라스미드 벡터의 T 부위와 연결할 수 있다. 이 과정에서 T-vector를 이용하여 PCR 산물을 효율적으로 클로닝하는 기법을 실제로 적용하였으며, 이를 통해 재조합 플라스미드를 획득하였고, 해당 오프닝에 Insert DNA가 잘 들어가 있는지를 확인하기 위한 다양한 분석 방법을 수행하였다. 미니 프렙은 재조합 플라스미드 DNA를 정제하는 과정으로, 세포의 파쇄와 동시에 플라스미드를 분리하여 최종적으로 고순도의 DNA를 얻기 위한 실험이다. 이 과정에서 원심분리 및 청소 과정을 통해 불순물을 제거하고, 정제된 DNA를 얻었다. 이어서 수행한 제한 효소 분석에서는 특정 제한 효소를 사용하여 클로닝한 유전자 조각을 자르고, 이를 통해 DNA 조각의 크기와 구성을 확인할 수 있었다. 마지막으로 겔 전기영동을 사용하여…(생략)