분자생물학 실험 (A＋) Mammalian cell cultrure and transfection 결과보고서

1. 실험 방법

이번 실험에서는 세포 배양과 형질 전환 과정을 통해 포유류 세포에서 유전자의 발현을 확인하고자 하였다. 실험에 사용된 세포주는 HEK293 세포로, 이 세포는 유전자 발현 연구에 널리 사용되는 세포주이다. 실험은 크게 두 단계로 나뉘며, 첫 번째 단계는 세포 배양이고 두 번째 단계는 형질 전환 과정이다. 세포 배양을 위해 먼저 HEK293 세포를 구매하거나 저장된 세포주로부터 해동하였다. 이때, 세포를 해동할 때는 물속에서 37도에서 약 1~2분 동안 해동한 후, 멸균된 배양 매체인 DMEM(Dulbecco`s Modified Eagle Medium)과 10% FBS(Fetal Bovine Serum)를 포함한 배지에 넣어 세포가 회복할 수 있도록 하였다. 해동한 세포는 15ml 튜브에 옮긴 후, 약 10분간 1,200 rpm으로 원심분리하여 잔여 용매를 제거하고 새로운 배양 매체에 세포를 resuspend하였다. 이 과정에서는 세포의 생존율을 높이기 위해 과도한 스트레스를 주지 않도록 주의하였다. 세포를 새 배양기에 이전한 후, 37도에서 5% CO2 조건에서 배양하였다. 약 2~3일 후, 세포가 70~80% 가까이 접시바닥을 덮기 시작하면, 세포가 충분히 증식한 것으로 판단하였다. 이때, PBS(Phosphate B…(생략)