[A0] 서강대 현대생물학실험2 4차 풀레포트 - GFPuv를 이용한 Site-directed mutagenesis의 실습과 DNA sequencing 결과의 분석 연습

1. Abstract

본 실험은 GFPuv(형광 단백질)를 이용한 site-directed mutagenesis 기법을 적용하여 특정 유전자의 변이를 유도하고, 이의 서열 분석 결과를 통해 mutagenesis의 성공 여부를 평가하는 데 목적이 있다. GFPuv는 자외선에서 발광하는 형광 단백질로, 유전자 부위의 변화를 시각적으로 확인할 수 있는 존경받는 도구이다. site-directed mutagenesis는 특정 염기의 치환 또는 변화를 통해 단백질의 기능적 특성을 조사할 수 있는 기술로, 현대 생물학에서 중요한 연구 기법으로 자리잡고 있다. 실험의 첫 단계로, 목표로 하는 유전자의 서열을 분석하고 특이적인 변이를 도입하기 위해 프라이머를 설계하였다. 이 프라이머들은 mutagenesis 과정에서 특정 위치의 염기를 변형하여 원하는 유전자 형질을 얻기 위해 사용되었다. 이후 PCR(중합효소 연쇄 반응) 과정을 통해 변이된 DNA 조각을 증폭하였고, 이 과정에서 고온에서의 DNA 변성 및 저온에서의 프라이머 결합이 이루어져, 타겟 DNA의 정밀한 복제가 가능해졌다. 이어서, 변이된 형질을 확인하기 위해 생성된 DNA 조각의 서열 분석을 실시하였다. DNA 서열 분석은 Sanger sequencer를 이용하여 실행하였고…(생략)