[A0] 서강대 현대생물학실험2 1차 풀레포트 Gene cloning을 위한 Competent cell의 제작과 target DNA의 증폭과 정제

1. Abstract

Gene cloning은 특정 유전자를 분리하고 복제하여 연구나 산업적 용도로 활용하는 중요한 기술이다. 이 실험에서는 유전자 클로닝을 위한 competent cell의 제작과 target DNA의 증폭 및 정제 과정을 수행하였다. Competent cell은 외부 DNA를 효과적으로 흡수하여 형질전환을 가능하게 하는 세포로, Escherichia coli와 같은 모델 생물에서 유전자 클로닝의 핵심 역할을 한다. 실험에서는 먼저 CaCl2 처리를 통해 E. coli 세포를 competent한 상태로 만들어, 외부 DNA의 도입을 용이하게 하였다. 세포의 처리 과정에서는 배양 온도, 배양 시간, 그리고 염의 농도가 중요한 변수로 작용하여 성공적인 competent cell을 제작하는 데 영향을 미친다. 다음으로, target DNA를 증폭하기 위해 PCR(Polymerase Chain Reaction) 기법을 사용하였다. PCR은 특정 DNA 서열을 선택적으로 복제하는 방법으로, 고온에서 DNA의 이중나선을 분리한 후, 특정 프라이머를 사용하여 원하는 부분을 증폭한다. 과정에서 Taq 폴리메라아제를 사용하여 빠르게 DNA의 중합을 유도하고, 반복적인 변온 사이클을 통해 수천 배의 DNA 복제를 달성하였다. 여기서 증폭된 DNA는 경로에 따라…(생략)