Ligation 결과레포트

1. 실험결과

실험 결과는 다양한 조건 하에서의 리게이션 성공 여부를 평가하기 위한 실험 데이터를 포함한다. 첫 번째로, PCR로 증폭된 DNA 조각들과 벡터의 전기장 자극에 따른 연결 상황을 관찰하였다. 실험에 사용된 벡터는 pGEM-T Easy Vector로, TA 클로닝을 통해 원하는 DNA 단편을 삽입하는 방식이다. 여러 가지 농도의 DNA 조각을 사용하여 최적의 리게이션 조건을 찾았다. 실험에서는 0. 01, 0. 1, 0. 5, 0과 0 μg의 DNA 조각을 각각 사용하였고, 리게이션 효소인 T4 DNA 리가제를 사용하여 16시간 동안 16도에서 반응을 진행하였다. 리게이션 후, 생성된 플라스미드는 E. coli 세포에 형질전환하여 콜로니 선택을 통해 성공적인 리게이션 여부를 확인하였다. 최종적으로 얻어진 콜로니 수를 통해 리게이션 효율을 판단하였다. 시각적으로 확인된 결과, DNA 조각이 벡터에 성공적으로 결합한 경우에는 유전자 발현이 이루어지며, 특정 항생제에 대한 내성을 나타내는 콜로니들이 형성되었다. 실험에서 가장 높은 리게이션 성공률을 보인 조합은 0. 1 μg 농도로, 이 경우 약 80%의 콜로니에서 목적 유전자가 포함된 것으로 확인되었다. 반면, 0 μg 농도를 사용…(생략)