3. ½ÇÇè °úÁ¤ :
¨ç. E-coly±ÕÀ» spectrafuge·Î 5ºÐ°£ 600rpmÀ¸·Î µ¹¸° »óÃþ¾×¸¸ µû³½´Ù.
¨è. solution 1À» 300micro§¤¾¿ ÁÖÀÔÈÄ vortexing ÇÑ´Ù.
¨é. solution 2¸¦ 300micro§¤¾¿ ÁÖÀÔÈÄ shaking ÇÑ´Ù.
¨ê. solution 3À» 300micro§¤¾¿ ÁÖÀÔÈÄ shaking ÇÑ´Ù.
¨ë. ¾óÀ½¿¡ ³ÖÀºÈÄ 5ºÐÁ¤µµ ±â´Ù¸°´Ù.
¨ì. 14000rpmÀ¸·Î 10ºÐÁ¤µµ spectrafuge¿¡ µ¹¸°´Ù.
¨í. ´Ù¸¥ E-tube¿¡ »óÃþ¾× ºÐ¸®½ÃŲ´Ù.
¨î. ºÐ¸®µÈ »óÃþ¾×¿¡¼ 550micro§¤ isopropyl Alchol·Î Dna¸¸ ħÀü
½ÃŲ´Ù.
¨ï. 14000rpmÀ¸·Î 5-10ºÐÁ¤µµ spectrafuge¸¦ µ¹¸° ÈÄ »óÃþ¾×À» ¹ö¸®°í ¹Ø¿¡ Dna¸¸ ³²°Ü
³õ´Â´Ù.
. EtohÀ» 300micro§¤ ³Ö¾î ºÒ¼ø¹°Àº °É·¯ÁØ´Ù.
. 1ºÐÁ¤µµ spectrafuge¿¡ ³Ö°í µ¹¸°ÈÄ vaccum¿¡ ³Ö¾î ¸»¸°´Ù.
. t.e buffer , RNASE¸¦ ³Ö¾î ºÒ¼ø¹° Á¦°ÅÇØÁØ´Ù.
4. ½ÇÇè ¿ø¸® : ±âº»ÀûÀÎ ¿ø¸®´Â ¼¼±ÕÀÇ cell wall °ú cell membrane À» ºÎ¼ö°í plasmid DNA ¸¸À» ºÐ¸®ÇÏ´Â °ÍÀÌ´Ù. ÀÌ ¶§ Áß¿äÇÑ °ÍÀº ¼¼±ÕÀÌ ¿ø·¡ °¡Áö°í ÀÖ´Â chromosomal DNA ¿Í plasmid DNA ¸¦ ±¸ºÐÇÏ¿© ºÐ¸®¡¦(»ý·«)
|