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`분석화학실험` ABS : 흡광광도법

1. Object & Theory

흡광광도법
시료 물질이나 시료 물질의 용액 또는 여기에 적당한 시약을 넣어 발색시킨 용약의 흡광도를 측정하여 시료중의 목적 성분을 정량하는 방법이다.
-투과도
시료를 투과한 에너지와 시료를 투과하기 전에 투여한 에너지와의 비율. 용액 내의 투과와 용매만의 투과로 비율을 나타낸다.
-흡광도
시료물질에 대한 입사광의 강도를 I0`, 투과광의 강도를 I로 하여, log10(I0/I)로 표시되는 수치. 램버트베르의 법칙(Lambert-Beer’s law). 즉 흡수물질의 흡광도가 그 광로의 길이와 농도의 면적에 비례한다는 법칙에 근거하여 흡광도로부터 물질의 농도를 측정할 수 있다. 비색계 등으로 측정에 이용하는 cell이나 광로의 길이를 보정하지 않고 측정한 값을 미보정흡광도(absorbancy)라고 하는 데 반해, 이들 보정한 값을 진(眞)흡광도(absorbance)라고 한다.
람베르트-베르의 법칙(Lambert-Beer`s law)
기체 및 용액에서의 빛의 흡수에 관한 람베르트의 법칙 및 베르의 법칙을 합친 것이다. 기체나 용액에 빛을 쪼인 뒤 통과해 나온 빛의 세기는 흡수층의 두께와 몰농도의 영향을 받고, 기체나 용액이 빛을 흡수하는 정도는 흡수층의 분자수에 비례하고, 희석도나 압력과는 무관하다는 것이다.
□ 투과도t 〓 lt / 10
□ 투과퍼센트(%) T 〓 t 100
□ 흡광도A 〓 log(l/t)
램버트 비어의 법칙
입사광의 강도 I0와 투과광의 강도 I의 비의 대수가 광을 통과하는 기층 또는 액층의 두께에 비례하여 log(I0/I)〓kd가 성립하는 Lambert의 법칙과 광의 흡수는 그것이 통과하는 층중의 분자 수에 의하여 결정되고 희석도에는 의존하지 않는다는 Beer의 법칙을 합한 것이다.
□…(생략)

(1)시약조사

(2)시약조제

(3)실험방법

1) 50ppm 인디고블루 용액을 위의 방법에 따라 단계적으로 희석한다.

2) 제조한 용액을 vial에 옮겨 담는다.

3) Spectrophotometer(분광광도계)를 이용하여 각 용액의 흡광도를 측정한다.

2. Observation & Result

(1)Observation



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ID : dnlg****
Regist : 2013-11-28
Update : 2021-01-02
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