plasmid DNA ̧̉
1. ¼·Ð
ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀÇ µµ¿òÀ¸·Î »ý¹°Ã¼ ³»ÀÇ ¿©·¯ °¡Áö »ýÈÇÐÀû ¹ÝÀÀÀÇ Á¶Àý°ú Áúº´ÀÇ Ä¡·á¿¡ ´ëÇÑ ÀÌÇØ°¡ ºÐÀÚÀû ¼öÁØ¿¡¼ ÀÌ·ç¾îÁö°í ÀÖ´Ù. DNAÀÇ »ý¹°Ã¼ ³»¿¡¼ÀÇ ÀÌ·¯ÇÑ ÀÛ¿ëÀÌ ¹àÇôÁü¿¡ µû¶ó ±× Á߿伺ÀÌ ´õ¿í ºÎ°¢µÇ¾ú°í, ÀÌ DNA¸¦ ¿¬±¸ÇÏ´Â ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀº Á» ´õ ³ªÀº °á°ú¸¦ À§Çؼ ÇÔ²² ¹ßÀüÇØ ¿Ô´Ù. ¿¹ÄÁ´ë, Àν¶¸°ÀÇ ´ë·®»ý»êÀ» À§ÇÑ Escherichia Coli ÀÇ cloning vector·ÎÀÇ È°¿ëÀº ´ë´ÜÈ÷ ¸¹Àº ´ç´¢º´ ȯÀÚµéÀ» µµ¿ÔÀ¸¸ç, À¯ÀüÀÚÀÇ ¹ßÇö ±âÀÛ±îÁöµµ ÀÌ ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀÇ ¹ß´Þ¿¡ ÀÇÇؼ °¡´ÉÇÏ°Ô µÇ¾ú´Ù. ¿ì¸®´Â ºÐÀÚ»ý¹°ÇÐÀ» ÀÌÇØÇϱâ À§ÇØ DNA¸¦ ´Ù·ç´Â ±âº»ÀûÀÎ ±â¼úµéÀ» À̹ø ½ÇÇè¿¡¼ ÀÍÇû´Ù. Escherichia Coli ¿Í Pseudomonas FluorescenceÀÇ chromosomal DNA¸¦ ÃßÃâÇÏ°í, E.Coli ÀÇ Plasmid¸¦ ÃßÃâÇؼ Á¦ÇÑÈ¿¼Ò 󸮸¦ ÅëÇØ plasmid »óŸ¦ È®ÀÎÇÔÀ¸·Î½á DNA¸¦ ´Ù·ç´Â ¹æ¹ýÀ» ÀÍÇû´Ù.
Chromosomal DNA Extraction
¼¼±ÕÀ¸·ÎºÎÅÍ DNA¸¦ ÃßÃâÇÏ´Â ¹æ¹ýÀÌ´Ù. ¼¼±Õ¿¡ SDS(¼¼Á¦)¸¦ °¡ÇÏ°í ¿Âµµ¸¦ ³ôÀÌ¸é ¼¼±ÕÀÇ ¼¼Æ÷º®¿¡ ºÙ¾î ÀÖ´ø ÀÎÁöÁúÀÌ ¿ëÇصǾî DNA¸¦ ¼¼Æ÷·ÎºÎÅÍ Çظ®½ÃŲ´Ù. DNA¿ë¾×¿¡ ¿¡Åº¿ÃÀ» °¡Çϸé DNA´Â¡¦(»ý·«)
2. ½ÇÇè¸ñÀû
3. ½ÇÇèÀç·á
4. ½ÇÇè¹æ¹ý
1) ½Å¼±ÇÑ LB agar plate¿¡¼ single colony¸¦ µû¼ LB+amp ¾×ü¹èÁö 10§¢¿¡ Á¢Á¾ÇÑ´Ù.
2) ±ÕÁÖ ÃÖÀû¿Âµµ(37¡É)¿¡¼ saturation µÉ ¶§±îÁö 12½Ã°£ ÀÌ»ó ¹è¾çÇÑ´Ù.(´ë°³ overnight).
1) E.co
|