»ý¸íÈÇÐ ½ÇÇè Report
(RT-PCR, Bradford assay, SDS page,
Genomic DNA prep)
1.Introduction
RT-PCR
DNA ¿¡¼´Â exon°ú intronÀÌ ÀÖÀ¸¹Ç·Î DNA¸¦ template·Î ÇÏ´Â °æ¿ì¿¡´Â exon°ú intronÀÌ ¸ðµÎ ÁõÆøµÉ ¼ö ÀÖ´Ù. ÇÏÁö¸¸ intronÀº exon¿¡ ºñÇؼ ¸Å¿ì Å©±â ¶§¹®¿¡ exon Áß¿¡ ¸î °³¸¦ ÇѲ¨¹ø¿¡ ÁõÆøÇÏ·Á¸é DNA·Î´Â Èûµé´Ù. ´õ±¸³ª intron sequence´Â ÀϺθ¦ Á¦¿ÜÇÏ°í´Â Á߿伺ÀÌ ¶³¾îÁø´Ù°í ÀÎ½ÄµÇ¾î ¹àÈ÷Áö ¾ÊÀº °ÍÀÌ ¸¹¾Æ GenBank¿¡¼µµ ãÀ» ¼ö ¾ø´Â °æ¿ì°¡ ¸¹´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ ÀÌÀ¯ ¶§¹®¿¡ mRNA¸¦ template·Î Çؼ PCRÇÏ´Â ¹æ¹ýÀ» RT-PCR(Reverase Tran½ºÅ©¸³Æ®ase-Polymerase Chain Reaction)À̶ó°í ÇÕ´Ï´Ù. ÀÌ °æ¿ì´Â ¾Õ¿¡¼ ¼³¸íÇÑ PCRÀ» ½ÃÇàÇϱâ ÀÌÀü¿¡ RNA·ÎºÎÅÍ DNA¸¦ ÇÕ¼ºÇØ ÁÖ´Â È¿¼Ò(RNA-dependent DNA polymerase)ÀÎ reverse tran½ºÅ©¸³Æ®ase¸¦ ó¸®ÇÑ´Ù.
¸Ç ¸ÕÀú reverse tran½ºÅ©¸³Æ®ase·Î RNA¸¦ complementary DNA(cDNA)·Î ¿ªÇÑ´Ù. À̶§´Â downstream primer¸¸ »ç¿ëÇÏ°Ô µÇ´Âµ¥ ¿Ö³ÄÇϸé RNA´Â single strandÀ̱⠶§¹®ÀÌ´Ù. ±× ÈÄ »ý¼ºµÈ cDNA¿¡¼ ÀϹÝÀûÀÎ PCRÀÇ °úÁ¤À» ¹â¾Æ¼ À¯ÀüÀÚ¸¦ ÁõÆøÇÑ´Ù.
downst¡¦(»ý·«)
|