I. ¼·Ð
1. ½ÇÇè Á¦¸ñ: ½Ä¹°ÀÇ È£¸£¸ó
2. ½ÇÇè ¸ñÇ¥: À̹ø ½ÇÇè¿¡¼´Â 2°¡Áö Á¾·ùÀÇ ½Ä¹° È£¸£¸ó Auxin°ú BR(Brassinosteroid)°¡ ½Ä¹°¿¡ ³¢Ä¡´Â ¿µÇâÀ» °üÂûÇغ¸¾Ò´Ù.
3. ¹è°æ Áö½Ä
1) ±â³» ¹è¾ç
½Ä¹°±â³»¹è¾ç(ÐïÒ®ÛÆå×, In vitro plant culture)Àº ½Ä¹°À» Åä¾ç µîÀÇ ¿ÜºÎ ȯ°æ°ú Â÷´ÜµÈ ¹«±Õ»óÅ¿¡¼ Àç¹èÇÏ´Â ¹æ¹ýÀÌ´Ù. ´ëÇ¥ÀûÀÎ ¿¹·Î Á¶Á÷¹è¾çÀÌ ÀÖ´Ù.
2)Auxin°ú BR
¿Á½ÅÀº ¼¼Æ÷º®½ÅÀå, ±¼±¤¼º, ±¼Áß¼º, Á¤´Ü¿ì¼¼Çö»ó, ¹è¹ß»ýÆÐÅÏ Á¶Àý, Áٱ⼼Æ÷±ºÀ¯Áö, ¹ß±Ù ÃËÁø, ±â°ü Çü¼ºµî ´Ù¾çÇÑ ½Ä¹°ÀÇ »ýÀå¹ÝÀÀ¿¡ °ü¿©Çϴ ȣ¸£¸óÀ¸·Î, polar transport·Î ½Ä¹° ¾Æ·§ºÎºÐÀ» ÇâÇØ ¿òÁ÷ÀδÙ. ¾Æ¹Ì³ë»êÀÇ ÇϳªÀÎ Æ®¸³ÅäÆÇ(Trp)À¸·ÎºÎÅÍ »ýÇÕ¼º µÇ°í, ¿Á½ÅÀÇ Á¾·ù Áß Indole-3-acetic acid (IAA)°¡ õ¿¬ ¿Á½ÅÀ¸·Î ÀÚ¿¬ »óÅ¿¡¼ °¡Àå ¸¹À¸¸ç ±× ¿Ü¿¡ ÇÕ¼º ¿Á½ÅÀ¸·Î NAA, 2,4-Dµî ´Ù¾çÇÑ Á¾·ù°¡ ÀÖ´Ù. ¹Ý¸é¿¡, BrÀº µ¿¹°ÀÇ ½ºÅ×·ÎÀ̵å¿Í À¯»çÇÑ ÈÇб¸Á¶¸¦ °®°í ÀÖ´Â ½ºÅ×·ÎÀ̵åÈ£¸£¸óÀÌ´Ù. ¼¼Æ÷½ÅÀå, Ⱥаü(Pollen tube growth)½ÅÀå, ¹ß¾Æ, °ü´Ù¹ßÁ¶Á÷ ¹× »Ñ¸®ÅÐ Çü¼º, ½ºÆ®·¹½º ÀúÇ×¼º µî ½Ä¹°ÀÇ ¿©·¯ °¡Áö »ýÀå°ú ¡¦(»ý·«)
4. ½ÇÇè Àç·á
5. ½ÇÇè ¹æ¹ý
1) ±â³»¹è¾ç¿ë ¹«±Õ¹èÁö(¾Ö±âÀå´ë ¹è¾ç¿ë) ¸¸µé±â
¨ç clean bench¸¦ 70% EtOH·Î ´Û°í Àڿܼ±À» ÄÑµÎ¾î ¹Ì¸® ¼Òµ¶µÈ clean bench¿¡ ÆäÆ®¸® µð½¬¸¦ µÐ´Ù. (clean bench°¡ ÃÖ¼ÒÇÑ ½ÇÇè 1½Ã°£ ÀüºÎÅÍ´Â ¼Òµ¶µÇ¾î ÀÖ¾î¾ß ÇÑ´Ù.)
¨è (5ÀÎ ±âÁØ) »ï°¢Çöó½ºÅ©¿¡ MS power¸¦ 0.55g (0.5X), plant agar 2.5g (1%), 250ml 1Â÷ Áõ·ù¼ö¸¦ ³Ö°í Àß Èçµé¾î ¼¯Àº ÈÄ ¶Ñ²±À» È£ÀÏ(2°ã)·Î ¸·Àº ´ÙÀ½ ¸ê±Õ Å×ÀÌÇÁÀ» ºÎÂøÇÑ´Ù.
¨é ¾Ð·Â¼ÜÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¸ç ¾Ð·ÂÀÌ ÃÖ´ë°¡ µÈ »óźÎÅÍ 15ºÐ°£ ²ú¿© ¸ê±ÕÇÑ´Ù.
¨ê ¸ê±ÕµÈ ¹è¾ç¹èÁö¸¦ ¾Ð·Â¼Ü¿¡¼ ²¨³» »ï°¢Çöó½ºÅ© ¿ÜºÎ¸¦ 70% EtOH·Î ´ÛÀº ´ÙÀ½ clean bench¿¡¼ ¾à 20ºÐÁ¤µµ ½ÄÈù´Ù. (¾à 50-60¡É Á¤µµ)
¨ë-1: Control ¹èÁö´Â ¾Æ¹«°Íµµ ÷°¡ÇÏÁö ¾Ê°í 90mm x 20mm plate¿¡ º×´Â´Ù. (250ml·Î ¾à 5~6°³ plate ºÎÀ» ¼ö ÀÖÀ½)
¨ë-2: +Auxin ¹èÁö´Â 1000X Stock(1mM)À¸·Î Á¦°øµÈ NAA¸¦ 250ul (250ml, 5ÀαâÁØ)³Ö°í Àß Èçµé¾î ¼¯Àº ÈÄ 90mm x 20mm plate¿¡ ºÎ¾î ±»Èù´Ù.
¨ë-3: +BR ¹èÁö´Â 1000X Stock(1mM)À¸·Î Á¦°øµÈ Brassinolide¸¦ 250ul (250ml, 5ÀαâÁØ)³Ö°í Àß Èçµé¾î ¼¯Àº ÈÄ 90mm x 20mm plate¿¡ ºÎ¾î ±»Èù´Ù.
¨ë-4: ¹èÁö¸¦ »¡¸® ½ÄÈ÷±â À§Çؼ, plate¸¦ clean bench¾È¿¡ ÇÑ ÃþÀ¸·Î ½×Àº ÈÄ ¶Ñ²±À» ¿¾î³õÀº ÈÄ clean bench ¹®À» ´ÝÀº ÈÄ UV¸¦ Äѳõ°í ¸»¸°´Ù.
2) ¾Ö±âÀå´ë Á¾ÀÚ¸ê±Õ¹ý
¨ç ¹ÝÀ¸·Î Á¢¾ú´Ù°¡ Æì¼ ¼±À» ³½ A4 ¿ëÁö À§¿¡ Àû´ç·®(1ÀÎ´ç ¾à 20¿©°³)ÀÇ ¾Ö±âÀå´ë Á¾ÀÚµéÀ»
|